寵物清潔護理劑中防腐劑含量的高效液相色譜測定方法（fǎ）

寵（chǒng）物清（qīng）潔護理劑中防腐劑含量的高效液相色譜測定方法  

一、檢測意義與方法原理  

寵物清潔護理劑中常（cháng）用（yòng）防（fáng）腐劑包括苯氧乙醇、山（shān）梨酸鉀、甲（jiǎ）基異噻唑啉（lín）酮等（děng），這些成分在有效抑製（zhì）微生物生長的同時，若過量添加可能引發寵物皮膚過敏或接觸性皮炎。高效液相色譜法（HPLC）通過保留時間定性和峰麵積定（dìng）量，可實（shí）現對多種防腐劑（jì）的快（kuài）速分離與準確（què）測定，具有（yǒu）分離效率高（gāo）、重現性好的特點，適用於寵物清潔產（chǎn）品的質量控製。  

二、實驗方法與步驟  

1.樣（yàng）品前處理  

稱取5.000g寵物清潔護理劑樣品（如沐浴露、濕巾提取液）於50mL離心管中，加入20mL甲醇-水（7:3，v/v）混合溶液，超聲提取20分鍾（功（gōng）率300W，溫度30℃），使防腐劑充分溶出。提取液（yè）經4000rpm離心（xīn）10分鍾，取上清液過0.22μm有機濾膜，待測。若樣品基質複（fù）雜（如含大量油脂），可（kě）采用（yòng）固相萃取淨化：取10mL濾（lǜ）液上樣至OasisHLB固相萃取柱（500mg/6mL），依次用5mL水和5mL甲醇洗（xǐ）脫，收集洗脫液氮吹至（zhì）近幹，用初始流動相定容至10mL。  

2.色譜（pǔ）條件  

色譜柱（zhù）選用AgilentZORBAXSB-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相A為0.1%磷酸水溶液，流動（dòng）相B為乙（yǐ）腈；梯度洗脫程序：0-5min，10%B；5-15min，10%B→90%B；15-20min，90%B；20-20.1min，90%B→10%B；20.1-25min，10%B。流（liú）速1.0mL/min，柱溫30℃，檢測波長254nm，進樣量10μL。  

3.標準曲線製備與定量  

配製防腐劑混合標準溶液係列，濃度分別為（wéi）0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L，在上述色譜條件下進樣分析，以濃度為橫坐（zuò）標、峰麵（miàn）積為縱坐標繪製標準曲（qǔ）線，計算回歸方（fāng）程和相關係數（R²）。樣品中防腐劑濃度按公式計算：防腐劑含量（mg/kg）=（由標準曲線得到的濃度×定容（róng）體積×稀釋倍數）/樣品質量。  

三、方法（fǎ）驗證與質量（liàng）控製（zhì）  

1.方法學參數  

線性範圍：0.01-1.0mg/L範圍內，苯氧乙醇、山梨酸鉀等防腐劑的相（xiàng）關係數R²均大於0.999；檢出限（xiàn）（LOD）為0.005mg/kg（S/N=3），定量限（LOQ）為0.015mg/kg（S/N=10）。精密度試驗：對0.1mg/L標準溶液平行測定6次，相對標準偏差（RSD）≤4.5%。加標（biāo）回（huí）收率：在低（0.02mg/kg）、中（0.1mg/kg）、高（0.5mg/kg）三個水平下，加標回收率為82%-118%，滿足檢測要求。  

2.幹擾（rǎo）消除  

樣品基質中的（de）表（biǎo）麵活（huó）性劑可能幹擾防腐劑分離，通過優化（huà）流動相pH值（zhí）（調節至2.5）和梯度洗脫程序，實現目標物與基質峰的基線分離；對於（yú）含油脂樣品，固相萃取淨化可有效去除脂溶性雜質，降低基質效應。  

四、實際樣品分析  

應用建立的方法對30批市售寵物清潔護理劑進行檢測，包括犬用（yòng）沐浴露（15批）、寵物濕巾（10批（pī））、護毛（máo）素（sù）（5批）。結果顯示：12批樣品檢出苯氧乙（yǐ）醇（含量0.02%-0.08%），8批檢出山梨酸鉀（0.01%-0.05%），均未超出GB/T34857-2017《化妝品安（ān）全技術（shù）規範》中防（fáng）腐劑限（xiàn）liang要求（苯氧乙醇≤1.0%，山梨酸鉀（jiǎ）≤0.6%）；2批（pī）樣品檢出（chū）甲基異噻唑啉酮（MIT），含量0.001%-0.002%，符合寵物產品添加（jiā）限值。  

五、結論  

本方法通過優化樣品前處（chù）理和色譜條件，可快（kuài）速準確測定寵物清潔（jié）護理劑中多種防腐劑含量，具有操作簡便（biàn）、靈（líng）敏度高、重現性好的特點。該方（fāng）法（fǎ）適用於（yú）寵物清潔產（chǎn）品的日常質量監控，為保障寵（chǒng）物用產品安全提供了（le）技術支持。