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    細胞劃（huá）痕實驗-第（dì）三方檢測機構

    發布時間： 2024-07-08　　點擊次數： 1496次（cì）
    　　細胞劃痕實驗又（yòu）叫創傷愈合實驗，當細胞（bāo）生長（zhǎng）至融（róng）合成單層狀態時（shí），在細胞層上人為製造一個空白區域，稱為“劃痕/傷口”，通過一段時間的培養，邊緣（yuán）的細胞（bāo）會逐漸向無細胞區域遷移，使“傷口”愈合，通過測量細胞遷移距（jù）離及速度反映細胞的（de）遷移能力及修複能力。
     
    　　在化（huà）妝品修複功效評價中，細胞劃痕實（shí）驗可以模擬皮膚受損後的自然愈合過程，用於（yú）觀察化妝（zhuāng）品等外源因素對細胞遷移、修複和相互作用的影響。
     
    　　17.c18起草视频檢測可開展細胞劃痕實驗，評估化（huà）妝品成分（fèn）或產品對促進皮膚修複（fù）和愈合效果，出具（jù）的化妝品修複功效評價報告具有CMA資質。
     
    　　細胞劃痕實驗應用（yòng）方向
     
    　　遷移能力：實驗中細胞遷移填充（chōng）劃痕區域的速度可以作為評估（gū）化妝品促進皮膚愈合的一個指標。在實驗中（zhōng）表現出強遷移能力的化妝品成分，可能在實際應用中有助於（yú）加快皮膚受損區域的修複。
     
    　　增殖效果：細胞在劃（huá）痕區域的增殖情況（kuàng）反映了化妝品促進皮膚細胞再生的潛力。增殖（zhí）效果好的化妝品（pǐn）可能在實際使用中有助於皮（pí）膚恢（huī）複活力和彈性。
     
    　　安全性評（píng）估：通過（guò）細胞劃痕（hén）實驗可以（yǐ）初步評估化妝品成分的安全性。如果在細胞水平上沒有表現出毒性或負麵影（yǐng）響，這為進一步的體（tǐ）內測試和人體試驗（yàn）提供了基（jī）礎。
     
    　　劑量效應關係：實驗中可以測試不（bú）同濃度的化妝品成分，以確定有（yǒu）效劑量和安全劑量範圍，這有助於指導產品配方的開發。
     
    　　長（zhǎng）期效果預測：雖然細胞劃痕實驗是短期的，但它可以為預測長期皮膚修複效果提供一（yī）定的依據。例如，能夠顯著促進細胞遷移和增殖的成分，可能在實際使（shǐ）用中有（yǒu）助於減（jiǎn）少疤痕形成（chéng）。
     
    　　臨床試驗：細（xì）胞劃痕實驗（yàn）的結果需要通過臨床試驗（yàn）來（lái）驗證。臨床試（shì）驗可以在實際皮膚上評（píng）估化（huà）妝品的效果，包括（kuò）愈合時間、皮膚質地（dì）改（gǎi）善（shàn）和整體修複效（xiào）果。
     
    　　綜（zōng）合評（píng）估（gū）：細胞劃痕實驗隻是評估化妝品修複功效的多種（zhǒng）方法之一。它的結果需要與分子水平的研究、動物模型實驗以及其（qí）他體外實驗結（jié）果相結合，以全麵評價化妝品的功效。
     
    　　細（xì）胞劃痕實驗原理
     
    　　細（xì）胞劃痕實驗是通過在細胞單層上劃痕並通過延時顯微鏡定期捕獲圖（tú）像（xiàng），從而研究細胞遷移（yí）運動、修複能力和細胞間相互作用的實驗室技術，基本原理是：在融合的單層細胞上人為製造一個空白區域，稱為“劃痕/傷口”，劃（huá）痕邊緣的細胞會逐漸（jiàn）進入空白區域使“劃痕/傷口”愈合，於細胞遷移（yí）過程（chéng）中在開始和定期捕獲（huò）圖像（xiàng），通過測量（liàng）不同時間點的劃痕間距並計算差值，可對細胞的遷（qiān）移能力做出判斷。
     
    　　細（xì）胞劃痕實驗步驟
     
    　　1、準備
     
    　　所有能滅菌的器械（xiè）都要滅菌（jun1），包括直尺(或者24孔板（bǎn）蓋)和marker筆在操作前紫外照射30min(超淨台內)。
     
    　　2、流程
     
    　　1)鋪板：將細胞消化後加入培養基終止（zhǐ）消化，將細胞吹打均勻（yún），然後按比例鋪板（bǎn）。如果不均勻（yún）可以用手掌對著一橫邊和一縱邊輕輕拍打，切忌四個邊都拍打，這樣細胞（bāo）很容易聚到中間。
     
    　　2)掌握細胞狀態，過（guò）夜能長滿為佳。
     
    　　3)第二天用黃槍頭比著直尺（chǐ）(或者槍頭，板蓋)，垂直在原來的培（péi）養基（jī）裏劃痕，每孔1道（dào）(也可多劃（huá）幾道，參考細胞狀態)，槍頭要（yào）垂直，不能傾（qīng）斜。
     
    　　4)用PBS清洗細胞1-2次，去除劃下的細胞，加入低血（xuè）清（qīng）培養（yǎng）基(或者培養基)；然（rán）後去顯微鏡下拍照，盡量高倍鏡（jìng）低倍鏡都拍照，可以事先在板子底部用Marker筆畫（huà）上小圓圈標記來保證能拍到同一個點，作好記錄。
     
    　　5)加（jiā）藥，放入37度5%CO2培養（yǎng）箱（xiāng），培養時間依照（zhào）實驗要求進行，通常以12h、24h、48h為準。按（àn）所需時間節點安排取樣拍照時間。
     
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