病毒保存液病毒滅活效果檢測

病毒保存液適用於病毒、流感病毒、手足口病毒等常見病毒樣本采集保存運輸（shū）工作，是（shì）采樣管內浸末（mò）采樣（yàng）拭（shì）子病毒樣本一（yī）種保護病毒（dú）的被檢測物質的液體，可采集咽拭子、鼻拭子或特定部（bù）位（wèi）組織樣本，儲（chǔ）存的樣（yàng）本可（kě）用於後續的核酸提取或純化（huà）等臨床實驗。

病毒保存液通常分為兩種，一種是非滅活（huó）型，能（néng）夠保護（hù）病（bìng）毒的蛋白和核酸，另一種（zhǒng）是滅活型，通常含有滅活病毒（dú）的裂解鹽，裂解蛋（dàn）白而保護核酸。

滅活型病毒保存液：主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解（jiě）型保存液，裏麵添加（jiā）有高濃度的裂（liè）解鹽（yán），能夠迅速高效地使待測樣本利的（de）病毒蛋白裂（liè）解（jiě）失活，可以有效防止感染（rǎn），同時又含有Rnase酶抑（yì）製劑，能保（bǎo）護病毒（dú）核酸不被降解，後續的NT-PCR實（shí）驗隻要能（néng）檢測出病毒的核（hé）酸即可以做出診（zhěn）斷。而（ér）且能在常溫下保存（cún）相對較長的時間。

非滅活（huó）型保存液：主（zhǔ）要是以運送培養基為基礎改良的（de）病毒（dú）維持液型保存液。這一種是同時保留了病毒的蛋白質外殼以及（jí）病毒核酸DNA或者RNA，這（zhè）樣病毒在體外具有蛋白（bái）抗原表位（wèi）和核酸的完整性（xìng），當然操作失誤時也有一定的感（gǎn）染性（xìng）風險（xiǎn）。采樣後長時間保存需要保持嚴格（gé）低溫。

17.c18起草视频檢測可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活（huó）效果檢（jiǎn）測，病毒保存液檢測可針對（duì）不同保存溫度、不同（tóng）保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活（huó）率。

病毒保（bǎo）存液檢測方法

1. 試驗對象：

毒株（zhū）:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)

細胞: MDCK細胞.

2.試驗步驟：

1）取樣品病毒保存液（非（fēi）滅活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原（yuán）液混勻，分裝若幹測試液，存（cún）至要求溫度;

2）保（bǎo）存至對應天數後取出（chū）測試液，檢測病毒滴度；

a）10倍倍比稀釋測試液；

b）將稀釋液（yè）加入含生長至單層的MDCK細胞的96孔（kǒng）細胞培養板上，並設置正常對照組，加等量培養液；

c）置於35'C、5%CO2的（de）培養箱中孵育60 min後棄去上（shàng）清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培（péi）養液繼續孵育3~5天，每天（tiān）觀（guān）察細胞增長狀況；

d）當接種病毒的MDCK細胞出現變圓或縮小等病變現象時，記錄產生細胞病（bìng）變的情（qíng）況;

e）根據Reed-Muench公式計算半數感染量TCID50。

病毒保存液病毒滅活效果檢測