三種消（xiāo）毒劑檢測方法分析對（duì）比

　　三種消毒劑檢測方法分（fèn）析對比
　　對三種消毒劑檢測方法戊二醛溶液，二（èr）氯（lǜ）異氰尿酸鈉溶液係滅枯草杆菌黑色變種芽孢的效果進行了比較。結果， 用（yòng）歐洲標（biāo）準懸液定量殺菌（jun1）試驗． 改（gǎi）良歐洲懸液定量殺菌試（shì）驗和載體浸泡定量殺（shā）菌試驗（yàn）檢（jiǎn）測（cè）含戊二醛2％ (g／m1)溶液殺滅枯草杆菌黑（hēi）色變種芽化達消毒（dú）合格標準， 作用時間分別為2.5．3.0，2.0 h。用前兩方法檢測含有效氯4 500 mg／L的（de）二氯異（yì）氰尿酸（suān）鈉溶液及用載（zǎi）體方法檢測含有效氯l 000 mg／L該液殺滅枯草杆菌黑色變種芽孢達消毒合格標（biāo）準，作用時間分別為30，20．10 min。當染菌片（piàn）的芽孢（bāo）懸液中增含小牛血清50%(ml／m1)時， 用載體方法檢（jiǎn）測含有效氯5 000 mg／L的二氯異氰（qíng）尿酸鈉溶液殺滅該芽孢達消毒合格標準，作用時間近20 min， 與用（yòng）歐洲標準懸液法檢測者（30 min)相（xiàng）近 表明三（sān）種方法檢測受有機物影響較小的戊二醛殺菌效果相差較小（xiǎo），檢（jiǎn）測受有機物影響較大的二氯（lǜ）異氰尿酸鈉殺菌效果相（xiàng）差較大（dà）。後者可能與方法中含有機物多少有關。
　　消毒劑檢測方法
　　1、消毒劑檢測（cè）菌懸液與菌片的製備
　　在歐洲標準懸液（yè）法和改良歐洲懸液法中（zhōng）， 用含胰蛋白腖0，1％ (g／m1) 和氯化鈉0，85％ (g／m1) 的去離（lí）子水溶液(pH6 8～7 0)， 將枯草杆菌黑（hēi）色變種(ATCC9372）芽孢稀釋至規定（dìng）含菌量的懸液。在載體法中， 用含蛋白腖0．1％ (g／m1)的磷酸鹽緩衝液（yè）(PBS， pH 7．2～7，4)製成（chéng）的枯草杆菌黑色變種芽孢懸液滴染1，0 cm×1，0 cm 布片， 製成菌片。
　　2、消毒劑檢測中和劑選擇試驗
　　因懸（xuán）液法中和劑選擇試驗結（jié）果可適用於載體試驗中， 故試驗用（yòng）歐洲標準懸液法進行。試驗（yàn）設6組（zǔ）， 第l組到第5組， 皆將0．5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司產（chǎn）) 3％ (g／m1) 的去離（lí）子水溶液(過濾除菌後使用) 加入無（wú）菌試管（guǎn）中， 再加0，5 ml枯草杆菌（jun1）黑色（sè）變種芽孢懸液， 混勻。然後， 第l、2組均加入4．0 ml消（xiāo）毒劑溶液(用標準硬水配製)， 作用至預定（dìng）時間， 第l組吸（xī）取0，5 ml加到含有（yǒu）4．5 ml PBS的試管中， 第2組（zǔ）吸取（qǔ）0，5 ml加到含有4 5 ml中和劑溶液（yè）的試管中； 第3組（zǔ）加入4．0 ml中（zhōng）和劑溶液， 作用 預定時間， 吸取0、5 ml加到含有4，5 ml中和（hé）劑溶液的試管中； 第4組加入4．0 ml中和產（chǎn）物(1份消毒劑溶（róng）液加4份中和劑（jì）溶液， 中和作用l0 min) 溶（róng）液，作用（yòng）至預定時間， 吸取0．5 ml加到含有4．5ml中和（hé）產物溶液的試管中（zhōng）： 第5組加入4．0ml PBS， 作用至預定時間， 吸（xī）取0．5 ml加到含有4．5 ml PBS的試（shì）管中。第6組為（wéi）中和劑溶液、中（zhōng）和產物溶液和（hé）胰蛋白腖大豆蛋（dàn）白腖培（péi）養基(TSA)陰性對照。試驗結果，以第（dì）l組不（bú）長菌或長菌量遠低於第2組， 第2組長菌（jun1）量不低於l00 cfu／ml， 第3、4、5組長菌量達5．0×l0 ～5．0×l0。cfu／ml且組間菌數相差不超過l0％ ， 第6組不長菌， 為所選中和劑合適。
　　3、消毒劑檢測定（dìng）量殺菌（jun1）試驗
　　歐洲標準懸液定量殺菌試驗（yàn） 向試管內加入0．5 ml含牛血清白蛋白3％(g／m1) 的去離子水溶液和0．5 ml枯草杆菌黑色變種芽孢懸液（yè）， 混（hún）勻， 再加入4．0 ml消毒劑溶液(陽（yáng）性對照（zhào）組為（wéi）無菌（jun1）蒸（zhēng）餾（liú）水)，混勻並（bìng）立即記時。作用至規定時間， 取（qǔ）0．5ml混懸液， 加（jiā）於4．5 ml中和劑溶液中， 混勻。中和（hé）作用l0 min， 取（qǔ）0．5 ml該液或其稀釋液接種無菌平皿， 一式兩份。傾注l8～ 20 ml TSA 培養基， 混勻。置(37±1)℃培養72 h， 計數菌落數， 計算殺滅率。